我们通过核酸检测才能检测出身体内部的基因序列有没有问题,现在核酸检测的方法是pcr核酸检测,这种方法是什么意思,主要检测手段是什么,大概几天出结果。
PCR的意思是聚合酶链式反应,能够用来扩增DNA,从而将微量的DNA扩增到能够检测的程度。有些病毒的核酸是DNA,需要采用这个方法进行检测。所以PCR并不是进行的检查,而是检测DNA的一种方法。比如乙肝病毒DNA定量,用的就是这一种方法。检查DNA的目的,一方面是可以诊断疾病,如果连病原体的DNA都能检测到,就说明感染了这种病原体;另一方面是判断病毒复制的多少,从而判断病情严重程度或者治疗效果。
进行核酸检验,需要经过取样、留样、留存、核酸提取、上机检测五个步骤。
核酸检测的第一步就是采集人体分泌物,用鼻试子或咽试子擦拭鼻腔或咽后壁及双侧咽扁桃体处。
第二步医务人员进行留样,将试子头浸入细胞保存液中,折断尾部后立即旋紧管盖。
第三部要将样本放入密闭袋中,保存好并及时送检。
第四步将样本送进实验室,提取核酸。
第五步,将提取物进行荧光PCR扩增反应。
核酸检测操作过程需要几个小时,一般1-2天出结果。目前新冠病毒的核酸检测主要是使用RT-PCR法检测试剂盒,操作是:1、检测人员先用核酸提取试剂盒提取患者标本里的核酸。2、把提取到的核酸放进检测试剂中复制。3、结果判定。第1步和第2步都有严格的操作流程和操作条件,整体耗时在1-4小时之间,最后判定结果。医院的检测是上午统一上机,到统一出结果差不多5个小时,也就到了下午,然后统一上报,不会随到随检。所以下午或晚上所送的标本是第2天做,有的医院自己不具备实验室条件,不能做,需送到上一级实验室做,保守估计时间是1-2天。
所谓RT-PCR 就是将RNA的反转录(RT)和cDNA的扩增(PCR)相结合的技术。
① 提取病毒的RNA
先从样本中提取出病毒的RNA。具体来说,就是在样本中加入核酸提取试剂,把病毒破坏,让核酸释放出来。
② 把病毒RNA“反转录”成cDNA
通过反转录技术(RT),把病毒的RNA“反转”成一种特异DNA,即cDNA(因为病毒RNA结构不稳定,所以把病毒RNA转换成稳定的cDNA会更方便检测)
这里会用到核酸检测试剂盒中一种叫“反转录酶”的物质。而完成转录后,所有工作都将围绕cDNA展开。
③ 进行cDNA的扩增与检测
简单说就是扩增cDNA的数量。这里应用的就是PCR,全称聚合酶链式反应。具体来说,就是借助试剂盒中一些特殊物质,让cDNA不断复制,使其数量呈指数式增长。
当cDNA扩增的同时,试剂盒中还有一种叫荧光探针的东西同时工作。它会释放荧光信号,cDNA每完成一次扩增,荧光信号就会增加一点,而PCR检测仪就能记录到一个荧光信号增加的Ct值。
④ 出结果
这一步就是根据检测仪记录的Ct值,进行检测结果分析。
理想状态下,如果样本中有新冠病毒,那么在cDNA完成预订次数的扩增后,检测仪记录的Ct值就会形成一个逐渐上升的S形曲线,检测结果为阳性;如果没有类似的S型曲线,检测结果就为阴性。
做完以上所有工作,通常需要4~6小时。